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两种方法从林麝粪便提取DNA效率及分析
作者: 唐婕 [1] 李晶晶 [2] 王波 [2] 索丽娟 [1] 李斐然 [1] 刘文华 [1] 王艳 [1] 严兴荣
关键词: 林麝 DNA 粪便
摘要:采集林麝DNA样本获得快捷、有效的DNA提取方法是其分子标记,良种遗传选育的分子基础.以林麝粪便为研究对象,用常规和改良的方法比较提取林麝粪便DNA的效率,两种方法分别设为对照组和试验组.采集林麝粪便后分别在空气暴露0、2、4、6d.用对照组和试验组两种方法提取粪便DNA,以林麝GAPDH为目的基因,用PCR方法扩增样本.琼脂糖凝胶电泳分离DNA目的条带,以空气暴露0d的粪便DNA条带光密度值为参考,2、4、6d粪便DNA条带光密度值与0d进行比较获得相对光密度值.结果发现,随着时间延长,林麝粪便逐渐失去光泽,表面粗糙;对照组和试验组两种方法均能有效提取林麝DNA.试验组2d和4d与0d相比较DNA水平显著上升,6d与0d没有显著差异;对照组仅在2d提取的DNA水平上升,而4d和6d显著下降到0d的水平.以对照组为参照,两组各时间点相比,试验组获得的DNA水平显著高于对照组.研究结果表明,试验组提取DNA的方法可显著提高林麝粪便DNA的获得率.
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