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繁殖候选基因Lhx8的真核表达和定位分析
作者: 王晶晶 [1] ; 潘雪男 [1] ; 何晓芳 [1] ; 毛慧 [1] ; 王荣谈 [2]
关键词: 猪 Lhx8基因 真核表达 定位分析
摘要:从猪卵巢组织中提取总RNA为模板,采用RT-PCR方法获得了猪Lhx8基因的完整开放阅读框,将该基因克隆到真核表达载体pEGFP-N1中,经酶切分析和测序证明成功构建了真核重组质粒pEGFP-N1-Lhx8。将成功构建的pEGFP-N1-Lhx8分别转染猪肾细胞PK-15和猪颗粒细胞(GCs),转染后48h,通过荧光显微镜观察对猪Lhx8基因在这2种细胞中的定位特点进行分析。结果显示:绿色荧光呈点状分布,根据绿色荧光分布的位置,推测Lhx8蛋白很可能位于细胞核中。