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青稞类钙调素蛋白基因CML19的克隆、序列分析及原核表达

作者: 韦泽秀 [1] 原红军 [2] 扎桑 [2] 王玉林 [2] 徐齐君 [2] 曾兴权 [2] 尼玛扎西 [3]

关键词: 青稞类钙调素蛋白 CML19 序列分析原核表达

摘要：根据鉴定得到青稞类钙调素蛋白基因CML19的序列设计引物,以青稞叶片的cDNA为模板,扩增得到目的片段,对目的基因序列进行鉴定和分析,进一步构建该基因的原核表达载体pET28a-CML19,转入大肠杆菌BL21 (DE3),利用IPTG诱导外源蛋白质表达并检测.结果表明,扩增得到CML19的CDS序列全长为447 bp,编码的蛋白质含有148个氨基酸,分子质量为16.46 ku,理论等电点(p1)为4.40,总平均亲水性(GRAVY)为-0.176,不稳定系数为49.59,存在典型的EF手结构域;系统进化分析表明,青稞CML19与山羊草具有较近的亲缘关系;原核表达蛋白结果显示,重组蛋白主要以包涵体形式存在于沉淀中.初步阐明青稞CML19基因的序列特征,为进一步制备抗体、探讨CML19基因的功能奠定基础.

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青稞类钙调素蛋白基因CML19的克隆、序列分析及原核表达

作者: 韦泽秀 [1] 原红军 [2] 扎桑 [2] 王玉林 [2] 徐齐君 [2] 曾兴权 [2] 尼玛扎西 [3]

关键词: 青稞 类钙调素蛋白 CML19 序列分析 原核表达

关键词: 青稞类钙调素蛋白 CML19 序列分析原核表达