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农杆菌介导的胡麻转化因子的优化
作者: 李淑洁 [1] 罗俊杰 [1] 林玉红 [1] 裴怀弟 [1] 李闻娟 [2]
关键词: 胡麻 农杆菌介导法 转化因子 抗性苗率 gus表达率
摘要:农杆菌介导法是植物遗传转化的重要方法之一,为了提高农杆菌介导的胡麻遗传转化效率,以‘陇亚10号’和‘定亚22号’下胚轴为基因转化受体,以pCAMBIA3301为转化质粒,分析草铵膦选择压、下胚轴预处理(剥表皮、预培养)、农杆菌菌株、侵染时间和乙酰丁香酮对gus表达率/频率和抗性苗率的影响,优化以上转化因子参数,建立高效的胡麻遗传转化体系,为后续的胡麻功能基因组学研究和遗传改良奠定基础.结果表明:下胚轴愈伤组织诱导、分化和再生苗生根阶段的草铵膦选择压分别是10 mg/L、5 mg/L和2 mg/L;下胚轴预处理对gus表达率/频率无显著影响,却显著影响抗性苗分化率,不剥表皮和预培养3d抗性苗率分别提高5倍和9倍;农杆菌菌株和侵染时间都显著影响gus表达率/频率和抗性苗率,C58cl侵染60 min时gus表达频率最高,为7.5,抗性苗率为60.3%.乙酰丁香酮能显著提高C58cl和GV3101介导转化时gus表达频率.
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